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干热灭菌的生物监测方法

发布时间:2020-02-19    来源:    作者:    点击数:2238
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1、标准生物测试管制作方法

按照WS/T367的规定,将枯草杆菌黑色变种芽胞菌片装入无菌试管内(1片/管),制成标准生物测试管。生物指示物应符合国家相关管理要求。

2、监测方法

将标准生物测试管至于灭菌器与每层门把手对角线内、外角处,每个位置放置2个标准标准生物测试管,试管帽置于试管旁,关好柜门,经一个灭菌周期后,待温度降至80摄氏度左右时,加盖试管帽后取出试管。在无菌条件下,每管加入5ml胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB),36℃±1℃培养48小时,观察初步结果,无菌生长管继续培养至第7日,检测时以培养基作为阴性对照,以加入芽胞菌片的培养基作为阳性对照。

3结果判定

阳性独照组培养阳性,阴性对照组培养阴性,若每个测试管的肉汤培养均澄清,判定为灭菌合格,若阳性对照组培养阳性,阴性对照组培养阴性,而只要有一个测试管的肉汤培养浑浊,判定为不合格,对难以判定的测试管肉汤培养结果,取0·1ml肉汤培养物接种于营养琼脂平板,用灭菌L棒过接种环涂匀,置36℃±1℃培养48小时,观察菌落形态,并做涂片染色镜检,判断是否有指示菌生长,若有指示菌生长,判定为灭菌不合格,若无指示菌生长,判为灭菌合格。

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